Т спот тест как делается
Т спот тест как делается
Универсальный альтернативный вариант иммунологического исследования in vitro диагностики туберкулезного процесса путем количественного определения мононуклеарных клеток периферической крови, продуцирующих ИФН-γ в ответ на присутствие белков CFP-10 и ESAT-6 M. tuberculosis.
Иммунологический тест на туберкулез
Синонимы английские
Testing for tuberculosis infection
Прямая оценка функции T-клеток энзим-связывающий иммуноспотингом (ELISPOT).
Зарегистрирован в РФ в 2012 г. (рег. УД. № ФСЗ 2012/648).
Какой биоматериал можно использовать для исследования?
Как правильно подготовиться к исследованию?
Общая информация об исследовании
Возбудителем туберкулёза является микобактерия туберкулеза (МБТ, палочка Коха, Mycobacterium tuberculosis) – высокоустойчивый микроорганизм. В настоящее время описано около 150 видов микобактерий, но клинически значимыми признаны М. tuberculosis (более 90 % всех случаев туберкулезной инфекции), М. bovis (5 %) и М. africanum (около 3 % – главным образом среди населения стран тропической Африки).
Источником инфекции являются больные люди и животные. Наиболее распространен воздушно-капельный путь заражения, при котором возбудитель проникает в организм через верхние дыхательные пути, иногда через слизистые оболочки пищеварительного тракта или через поврежденную кожу.
Попадая в окружающую среду, возбудитель способен длительно сохраняться: в высохшей мокроте он выживают до 10 месяцев, на предметах, окружающих больного (белье, книги), – более 3 месяцев, в воде – более года, в почве – до 6 месяцев.
В настоящее время описаны следующие варианты развития ситуации после проникновения МБТ в организм человека: [1]
Присутствующий в организме возбудитель способен не только длительно бессимптомно персистировать в организме, но при определенных обстоятельствах (интенсивное размножение МБТ на фоне малоэффективного иммунитета и т.д.) реактивироваться и вызвать развитие заболевания. В настоящее время установлено, что с момента инфицирования МБТ в течение первого года заболевание развивается у 5 % инфицированных людей, в течение всей оставшейся жизни туберкулез развивается еще у 5 %, то есть пожизненный риск заболевания туберкулезом среди инфицированных составляет 10 %.
Вместе с тем наличие различных факторов может способствовать повышению риска развития локального туберкулеза: так, при ВИЧ-инфицировании ежегодный риск заболевания туберкулезом на фоне ЛТИ составляет 10 %, а пожизненный риск – 50 %.
Диагностика туберкулеза является комплексной и включает, согласно регламентирующим документам, [3] аллергические внутрикожные пробы (реакция Манту и «Диаскинтест»), инструментальное обследование (ФЛГ, рентген) и лабораторные – направленные как на выявление и идентификацию возбудителя с определением спектра его чувствительности к препаратам этиотропной терапии, так и на изучение выраженности иммунологической реакции на патоген.
Одним из современных и высокоинформативных методов определения специфической иммунной реакции на МБТ, особенно при отсутствии или минимальных клинико-инструментальных признаках инфекции и сомнительных результатах общепринятых методов лабораторной диагностики туберкулеза, является тест T-SPOT.
Исследование иммунного Т-клеточно-опосредованного ответа: количественное определение в крови эффекторных Т-клеток (CD4 и CD8), вырабатывающих ИФН-ɣ (гамма-интерферон), который продуцируется в ответ на стимуляцию специально подобранными антигенами ESAT-6 и CFP10. Эти белки входят в состав клинически значимых МБТ (М. tuberculosis, М. bovis, М. africanum) и отсутствуют у бактерий, используемых при производстве вакцины БЦЖ и у непатогенных для человека микобактерий.
Преимущества теста Т- SPOT:
Для чего используется исследование?
Когда назначается исследование?
Тест Т-SPOT.TB – альтернатива реакции Манту по анализу крови
Особенной подготовки не требуется. Для проведения теста берется анализ крови из вены натощак.
Время проведения теста Т-SPOT.TB составляет 2-3 дня.
Вакцинация БЦЖ не влияет на результат теста. В тесте T-SPOT.TB используются два специфических антигена M. Tuberculosis (ESAT-6 и CFP 10), которые не дают перекрестную реакцию с вакциной БЦЖ, а также с большинством распространенных видов нетуберкулезных микобактерий.
Ограничений по возрасту нет. Тест Т-SPOT.TB при необходимости можно делать детям с рождения.
Тест Т-SPOT можно делать, если в детском коллективе карантин, в то время как кожные тесты необходимо проводить не ранее чем через месяц после снятия карантина.
— Аллергические состояния
— Кожные заболевания
— Эпилепсия
— Обострение хронических соматических заболеваний
— Острые инфекционные заболевания
После контакта с больным туберкулезом тест Т-СПОТ можно провести через 1 месяц после контакта (время необходимо для формирования иммунного ответа). Кожные тесты после контакта с больным туберкулезом становятся положительными только через 2-6 месяцев. И через 4-6 месяцев повторить тест.
Для оформления карты в детские учреждения: Возможно. Тест Т-SPOT.TB не входит в приказ, но входит в Федеральные клинические рекомендации главного детского фтизиатра.
Как и любой иммунологический скрининг на туберкулез у детей необходимо проводить один раз в год. У пациентов групп риска тестирование проводится 2 раза в год.
Нет, данный тест может использоваться для обследования пациентов на туберкулез с любым заболеванием и при любом состоянии иммунной системы.
Нет, данный тест может использоваться для обследования на туберкулез у всех групп пациентов (включая детей любого возраста) при любых заболеваниях и состояниях организма.
Нет, данный тест может использоваться в любое время, независимо от вакцинации и приема препаратов.
Тест TSPOT.TB показывает более высокую чувствительность чем Квантифероновый тест, особенно у детей до 5 лет, пожилых и пациентов групп риска (пациенты на генно-инженерной терапии и ВИЧ-инфицированные) Тест T-SPOT.TB в отличии от Квантиферонового теста имеет Регистрационное удостоверение на территории РФ.
Отрицательные результаты теста T-SPOT.TB позволяют врачу-фтизиатру выдать справку
*Примечание: к рассмотрению не принимаются результаты:
— ИФА крови на туберкулёз,
— ПЦР крови на ДНК МБТ,
— ПЦР мокроты на ДНК МБТ.
Т.к. не являются специфическими, применяются, как уточняющие методы и не рекомендованы к использованию в качестве методов профилактического обследования.
T-SPOT: безопасная диагностика туберкулеза
Для чего нужен T-SPOT?
Наряду с пробой Манту, которая является обязательной для первичной диагностики туберкулеза, сегодня используют тест T-SPOT. Он дает объективную количественную оценку и выявляет не только сенсибилизацию, но и инфицированность микобактерией туберкулеза. Тест предназначен для выявления легочной и внелегочных форм туберкулеза.
Проба Манту или T-SPOT?
У T-SPOT нет противопоказаний и побочных реакций, вакцинацию БЦЖ можно проводить сразу после его проведения, отсутствует период ожидания реакции, так как анализ проводится с использованием крови in vitro.
Кому подходит T-SPOT?
Рост распространения ВИЧ-инфекции, увеличение миграционных потоков, особенно из азиатских районов с неблагоприятной эпидемиологической обстановкой, ставит под угрозу здоровье каждого. Треть всех инфицированных даже не догадывается о том, что бактерия уже поселилась в организме.
T-SPOT в мировой практике
Для ранней диагностики туберкулеза T-SPOT применяют уже более 13 лет в странах Европы, где он входит в официальные стандарты диагностики туберкулеза. Его также одобрили в США, Канаде, Китае, а с 2012 году внедрили в Российской Федерации.
Так как тест одобрен Федеральным законом №648/ 2012 г., его результаты вполне могут быть использованы для предоставления справки в детский сад или по месту требования.
В СИТИЛАБ можно сделать тест T-SPOT (код исследования 97-13-200) и получить расшифровку у специалиста.
T-SPOT: альтернатива пробе Манту при диагностике туберкулёза
Туберкулёз часто называют немой болезнью, поражающей все системы и органы человека кроме волос и ногтей. Его симптомы у детей родители не всегда воспринимают всерьёз: это отсутствие аппетита, похудение, частые простуды, потливость… Именно поэтому необходима своевременная иммунная диагностика, способная выявить микобактерии туберкулёза. О пробе Манту знают все, но есть ли альтернатива привычной «пуговке»?
В нашей стране микобактерия туберкулёза присутствует в организме 95% взрослых. Однако заболевание в активной форме возникает менее чем у 1%. Поэтому её наличие не означает болезнь. Пусковым механизмом является снижение иммунитета. Чаще всего туберкулёз диагностируется у людей в возрасте от 18 до 44 лет. До 18 лет ребёнку ежегодно полагается сдавать тест и оценивать реакцию иммунитета. На сегодняшний день существует два основных способа диагностики туберкулёза – это проба Манту (до 7 лет) и диаскинтест (с 7 до 18 лет). Есть ли альтернатива традиционным способам выявления туберкулёзной инфекции в организме?
Что такое Т-SPОТ?
От пробы Манту или диаскинтеста для своих детей многие родители отказываются в силу двух причин: это противопоказания и личные убеждения. Существует некая подмена понятий, когда безопасная во всех отношениях проба Манту воспринимается как прививка, а не как проверка состояния иммунитета.
В 2004 году в Оксфордском университете открыли альтернативный способ выявления туберкулёзной инфекции в организме в лабораторных условиях с помощью анализа крови, который называется Т-SPОТ.TB. В первую очередь он нужен для тех людей, кому противопоказаны внутрикожные пробы. Т — это Т-лимфоциты, SPOT в переводе с английского — это «пятно». TB — это международное название туберкулёза. Исследование покажет, есть ли микобактерии туберкулёза и в каком состоянии они находятся. Иммуноферментный количественный тест определяет число Т-лимфоцитов, которые вырабатываются для борьбы с микобактериями туберкулёза. Такой тест можно сдать и в Сочи: в лабораториях и клиниках. Для этого у человека берётся анализ крови из вены.
Показания для проведения T-SPOT
Также T-SPOT может применяться для диагностики беременных женщин, если у них был контакт с больным туберкулёзом.
Анализ T-SPOT является дополнительным в иммунодиагностике, но может использоваться в качестве замены пробы Манту или диаскинтеста.
Чем отличается T-SPOT от пробы Манту и дианскинтеста?
Самое главное отличие — в процедуре проведения теста. При традиционных способах диагностики заболевания туберкулёза — пробе Манту и диаскинтесте — применяется внутрикожное введение препарата. Для пробы Манту используется очищенный туберкулин, для диаскинтеста — это белки бактерий туберкулёза. При попадании веществ под кожу происходит местная реакция, по которой оценивают наличие в организме микобактерий туберкулёза.
Для диагностики туберкулёзной инфекции с помощью спот теста требуется кровь пациента, которую в дальнейшем отправят на исследование в лабораторию. Это главное отличие теста от пробы Манту и диаскинтеста. Ещё один схожий тест, которые проводят в пробирке — это квантифероновый тест. Главное отличие тестов друг от друга в методике исследований. Так, например, квантифероновой тест определяет гамма-интерферон (он вырабатывается в ответ на внедрение туберкулёзной палочки), а спот тест определяет Т-клетки (они вырабатывают гамма-интерферон на присутствие микобактерии туберкулёза).
Как подготовиться к сдаче крови на анализ Т-SPОТ?
Особой подготовки к сдаче анализа крови для теста не требуется. Анализ нужно сдавать утром натощак (не менее 4 часов после еды). Если вы долгое время принимаете какие-либо препараты, то сообщите об этом врачу. Забор крови производится из вены.
Технология проведения теста
После забора крови пациента её отправляют в лабораторию на исследование. Биоматериал подвергается стимуляцией белками-антигенами, которые можно обнаружить в составе микобактерий туберкулёза. В ответ на эти действия Т-лимфоциты вырабатывают гамма-интерферон. В местах заражённых клеток начинают появляться пятна. Результат — количественное значения выявленных Т-лимфоцитов.
В чём плюсы и минусы Т-SPOT?
Анализ крови: трактовка результата
Существует 3 разновидности результата теста:
После получения результата T-SPОТ, родителям необходимо показать тест фтизиатру. Врач осмотрит ребёнка и напишет заключение, которое можно показать в детском учреждении, будь то детский сад или школа. Однако результат одного анализа без справки от фтизиатра действительным считаться не будет. Не забывайте, что сотрудники детских учреждений — не врачи и расшифровкой результата диагностики заниматься не вправе.
Решение о конкретном выборе метода диагностики для вашего ребёнка с учётом его особенностей здоровья рекомендуется принимать совместно с фтизиатром.
Плюсы T-SPOT
— исследование без вмешательства в организм. Для диагностики туберкулёза необходим только анализ крови;
— исследование подходит детям с аллергическими реакциями и кожными болезнями;
— ранняя диагностика туберкулёза;
— высокая специфичность (специфичность достигает 97%, это способность теста не давать ложноположительный результат при отсутствии микобактерий);
— не реагирует на введение вакцины БЦЖ. Проба Манту может давать подобную реакцию;
— отсутствие побочных эффектов и противопоказаний для проведения теста;
— исследование подходит для беременных женщин, контактировавших с больными туберкулёзом.
Минусы T-SPOT
— не входит в список процедур по ОМС (можно пройти только на платной основе);
— исследование не позволяет выявить активность или динамику болезни;
— возможность сомнительного результата и, как следствие, потребность в дополнительной сдаче теста.
Т-спот и квантифероновый тест
По данным экспертов ВОЗ, треть населения земли инфицировано микобактериями туберкулеза, а у 5-20% из них вероятность развития активных форм туберкулеза сохраняется в течение всей жизни.
Цель ранней диагностики туберкулеза – предотвратить заражение здоровых людей в результате выявления инфицированных и не допустить трансформации латентной стадии заболевания в активную.
Инфицирование микобактериями туберкулеза без клинического, рентгенологического, бактериологического подтверждения называют латентной туберкулезной инфекцией (ЛТБИ).
ЛТБИ – это не болезнь, но фактор повышенного риска развития активного туберкулеза.
Самым распространенным тестом диагностики ЛТБИ во всем мире, в том числе и в России, является проба (реакция) Манту.
Реакция Манту – это специфический внутрикожный тест на основе туберкулина, в состав которого входит смесь антигенов инактивированной микобактерии туберкулеза и продукты ее жизнедеятельности. Но реакция Манту не всегда отражает реальное состояние организма – на ее результаты оказывают влияние склонность к аллергии, недавно перенесенная инфекция, погрешности в технике постановки пробы и многие другие факторы.
Основной недостаток пробы Манту – это сложность дифференцирования, основываясь на ее результатах, между инфицированием, поствакцинальной реакцией и латентной туберкулезной инфекцией.
Т-спот и квантифероновый тест
Как альтернатива реакции Манту учеными была разработана новая методика иммунодиагностики туберкулеза: Т-спот и квантифероновый тест, на результаты которых не влияет предыдущая вакцинация БЦЖ.
По чувствительности и достоверности эти методы равнозначны, показания для проведения одинаковы.
Как проводится иммунодиагностика туберкулеза?
Анализ проводится «in vitro» (в переводе с латинского «в стекле») – вне организма в пробирке.
В качестве биологического материала для проведения исследования у пациента берется венозная кровь натощак или не ранее 2-х часов после еды. Необходимый объем крови зависит от возраста пациента:
Расшифровка результатов:
После тестирования пациент консультируется фтизиатром – специалистом, который занимается выявлением, лечением и профилактикой туберкулеза.
Показания к применению:
Все существующие методики выявления туберкулезной инфекции не обладают 100% достоверностью, поэтому их используют как экспресс диагностику для отбора лиц с высоким риском перехода латентной формы туберкулеза в активную.