какие свойства микроорганизмов определяют разработку особых методов для выведения новых штаммов
Селекция микроорганизмов
Микроорганизмы продуцируют белки, витамины, антибиотики, липиды, ферменты, сахара и другие вещества, необходимые пищевой промышленности (хлебопечении, виноделии, производстве молочных продуктов), медицине, экологических технологиях и других сферах. Очевидно, что умение выводить микроорганизмы с определенными генетическими свойствами крайне важно.
Ученые, занимающиеся селекцией микроорганизмов, учитывают их следующие биологические особенности:
1. Очень большую скорость размножения — у исследователя есть практически неограниченный рабочий материал!
2. Способность существовать на дешевых в производстве субстратах.
3. Высокую частоту возникновения мутаций. Микроорганизмам присущ гаплоидный набор хромосом, мутации проявляются в первом же поколении.
4. Неоднородность штамма (чистой культуры микроорганизма, выделенного из какого-то источника или возникшего после мутации) и эффективность отбора.
5. Простоту генетической организации, относительно небольшое число генов.
Ключевые методы селекции микроорганизмов
1. Искусственный отбор (как массовый, так и индивидуальный).
2. Искусственно проводимый мутагенез.
3. Генная инженерия.
4. Клеточная инженерия.
5. Отметим, что метод гибридизации мало используется в селекции микроорганизмов.
1. С помощью тщательного искусственного отбора ученые выделяют расы микроорганизмов, которые способны к наиболее продуктивному синтезу какого-либо продукта, нужного человеку (витамина, антибиотика и пр.).
2. Как мы уже сказали, микроорганизмы очень часто подвергаются изменчивости (мутациям).
3. Отбор мутантов позволяет получить самые активные расы микроорганизмов. На специальных селективных средах мутанты благополучно растут, а вот родительские клетки, не мутировавшие (то есть дикие формы), гибнут. Ведется отбор по скорости роста мутантов и диких форм, по форме колоний, их окраске и пр.
1. Если в животноводстве этот метод почти не применяется, то в селекции микроорганизмов для него открыто широкое поле. Наиболее часто используется метод вызывания искусственных мутаций от воздействия радиации, рентгеновских и уф-лучей, а также ряда химических соединений.
2. Этим способом, в частности, скорость мутаций у микроорганизмов была повышена в сотни раз! Экспериментальное получение мутаций открыло широчайшие перспективы для выведения высокопродуктивных штаммов.
3. Огромных результатов удалось добиться в производстве антибиотиков, продуцируемых грибами. Например, российские ученые (генетик Алиханян и другие) вывели мутантные штаммы, которые производили антибиотики со скоростью, в десятки раз превышающую ту, с которой «работали» их «дикие родители».
4. В пищевой промышленности путем селекции были созданы высокопродуктивные формы дрожжей, которые повышают качество хлеба.
1. Использование клеток и различных биологических процессов в целях создания нужных человеку веществ, называют биотехнологией. Два ее главных направления: генная и клеточная инженерия.
2. Первое направление подразумевает целенаправленно производимые манипуляции с генетическим материалом в клетках микроорганизмов. Особое воздействие на ДНК дает возможность перенести из одного организма в другой наследственную информацию.
3. Значение данного метода в том, что он позволил внедрять человеческие гены в ДНК бактерий, и это дает возможность бактериям синтезировать человеческие белки (инсулин, соматотропин и пр.). Так, кишечная палочка после пересадки человеческого гена, начала производить инсулин.
1. Метод, позволяющий в одной клетке слить наследственные материалы разных, иногда очень далеких, видов. Она заключается в создании новых типов клеток через гибридизацию их содержимого. Искусственным образом объединяют целые клетки различных организмов, формируя гибридный геном.
2. Удается «сотворить» жизнеспособную клетку, словно из деталей «Лего», из разных кусочков других клеток (ядра, хромосом, цитоплазмы и пр.); также практикуют пересадку ядер, соединение разноклеточных протопластов (содержимого клетки за исключением внешней стенки и ядра).
1. Микробиология как отрасль промышленности сформировалась в середине XX века. Она использует микроорганизмы для создания органических веществ.
2. На бурной деятельности микроорганизмов основаны, в частности, такие направления пищевой промышленности, как производство витаминов, некоторых органических кислот, спирта, виноделие, хлебопечение и пр.
3. Специалисты микробиологической промышленности научились получать аминокислоты, белки, антибиотики, гормоны, ферменты и т. д.
4. Антибиотики, спасшие со времени своего открытия миллионы жизней на планете, являются продуктами жизнедеятельности ряда грибов и бактерий. Микробиологам с помощью искусственного мутагенеза и отбора более чем в тысячу раз удалось поднять продуктивность штаммов гриба пеницилла.
5. Микроорганизмы широко применяются для очистки сточных вод и повышения полезных качеств почвы.
6. В последние десятилетия разработаны способы получения с помощью бактерий меди, марганца, хрома из отработанной породы на старых рудниках, там, где традиционные методы добычи полезных ископаемых перестали быть экономически выгодными.
Селекция микроорганизмов

Всего получено оценок: 556.
Всего получено оценок: 556.
К микроорганизмам относятся прокариоты – бактерии, а также одноклеточные растения и животные – водоросли и простейшие. Эти живые существа играют важную роль в жизни человека и вовлечены в промышленность. Возникла отдельная отрасль – селекция микроорганизмов, помогающая создавать химические вещества, медицинские препараты, продукты питания.
Описание
Селекция одноклеточных организмов происходит несколько иначе, чем селекция многоклеточных растений и животных. Главная цель – добиться высокой производительности от одной клетки. Микроорганизмы синтезируют аминокислоты, белки, липиды, витамины, нуклеиновые кислоты, ферменты, пигменты, специфические органические вещества и т.д. «Дикие» штаммы, как правило, менее активны и производительны, поэтому человечество научилось стимулировать жизнедеятельность одноклеточных организмов.
Кратко о селекции микроорганизмов и её отличительных чертах:
Человечество научилось из 100 тысяч известных использовать несколько сотен видов микроорганизмов. Число «полезных» одноклеточных организмов растёт с каждым годом.
Методы
Основные методы селекции микроорганизмов представлены в таблице.
Метод
Особенности
Примеры
Выборка наиболее производительных и неприхотливых образцов микроорганизмов и культивирование их в искусственной среде
Внешнее воздействие на жизнедеятельность микроорганизмов. Применение ультрафиолета, радиации, химических веществ для получения необходимой мутации
Получение пекарских дрожжей
Выделение необходимых генов и внедрение их в другие организмы, преобразование, «редактирование» ДНК и РНК, создание генетически модифицированных организмов
Производство инсулина, ферментов
Генная инженерия является методом быстро развивающейся биотехнологии. Эта дисциплина изучает и практикует возможности использования живых организмов для получения необходимых человеку продуктов.
Значение
Человечество начало активно «приручать» микроорганизмы в начале ХХ века, когда стали появляться первые вакцины и антибиотики. Однако ещё в древние времена люди умели готовить пиво, вино, сыр, несознательно используя микроорганизмы. Современные технологии помогают извлекать из маленьких существ максимально большую пользу.
которые читают вместе с этой
Несколько примеров, какое значение имеет селекция микроорганизмов в современной промышленности:
Что мы узнали?
Из доклада для 9 класса узнали о способах и значении селекции микроорганизмов. Работать с микроорганизмами намного проще, чем с многоклеточными организмами, т.к. достаточно небольшого количества начального материала, чтобы получить миллионы клеток. Селекция одноклеточных организмов не требует больших затрат на пищу и обширных территорий. Селекцию проводят с помощью искусственного отбора и мутагенеза, а также с применением генной инженерии. «Культурные» одноклеточные организмы производят в большом количестве необходимые человечеству вещества – гормоны, ферменты, аминокислоты.
Лекция № 25. Селекция микроорганизмов. Биотехнология
Традиционная селекция микроорганизмов (в основном бактерий и грибов) основана на экспериментальном мутагенезе и отборе наиболее продуктивных штаммов. Но и здесь есть свои особенности. Геном бактерий гаплоидный, любые мутации проявляются уже в первом поколении. Хотя вероятность естественного возникновения мутации у микроорганизмов такая же, как и у всех других организмов (1 мутация на 1 млн. особей по каждому гену), очень высокая интенсивность размножения дает возможность найти полезную мутацию по интересующему исследователя гену.
В результате искусственного мутагенеза и отбора была повышена продуктивность штаммов гриба пеницилла более чем в 1000 раз. Продукты микробиологической промышленности используются в хлебопечении, пивоварении, виноделии, приготовлении многих молочных продуктов. С помощью микробиологической промышленности получают антибиотики, аминокислоты, белки, гормоны, различные ферменты, витамины и многое другое.
Микроорганизмы используют для биологической очистки сточных вод, улучшений качеств почвы. В настоящее время разработаны методы получения марганца, меди, хрома при разработке отвалов старых рудников с помощью бактерий, где обычные методы добычи экономически невыгодны.
Новейшими методами селекции микроорганизмов, растений и животных являются клеточная, хромосомная и генная инженерия.
Генная инженерия
Процесс создания трансформированных бактерий включает в себя следующие этапы.
Образование рекомбинантных плазмид:
1 — клетка с исходной плазмидой; 2 — выделенная плазмида; 3 — создание вектора; 4 — рекомбинантная плазмида (вектор); 5 — клетка с рекомбинантной плазмидой.
Эукариотические гены, в отличие от прокариотических, имеют мозаичное строение (экзоны, интроны). В бактериальных клетках отсутствует процессинг, а трансляция во времени и пространстве не отделена от транскрипции. В связи с этим для пересадки эффективнее использовать искусственно синтезированные гены. Матрицей для такого синтеза является иРНК. С помощью фермента обратная транскриптаза на этой иРНК сперва синтезируется цепь ДНК. Затем на ней с помощью ДНК-полимеразы достраивается вторая цепь.
Хромосомная инженерия
Хромосомная инженерия — совокупность методик, позволяющих осуществлять манипуляции с хромосомами. Одна группа методов основана на введении в генотип растительного организма пары чужих гомологичных хромосом, контролирующих развитие нужных признаков (дополненные линии), или замещении одной пары гомологичных хромосом на другую (замещенные линии). В полученных таким образом замещенных и дополненных линиях собираются признаки, приближающие растения к «идеальному сорту».
Метод гаплоидов основан на выращивании гаплоидных растений с последующим удвоением хромосом. Например, из пыльцевых зерен кукурузы выращивают гаплоидные растения, содержащие 10 хромосом (n = 10), затем хромосомы удваивают и получают диплоидные (n = 20), полностью гомозиготные растения всего за 2–3 года вместо 6–8-летнего инбридинга.
Сюда же можно отнести и метод получения полиплоидных растений (см. Лекция 23 «Селекция растений»).
Клеточная инженерия
Клеточная инженерия — конструирование клеток нового типа на основе их культивирования, гибридизации и реконструкции.
Клетки растений и животных, помещенные в питательные среды, содержащие все необходимые для жизнедеятельности вещества, способны делиться, образуя клеточные культуры. Клетки растений обладают еще и свойством тотипотентности, то есть при определенных условиях они способны сформировать полноценное растение. Следовательно, можно размножать растения в пробирках, помещая клетки в определенные питательные среды. Это особенно актуально в отношении редких или ценных растений.
С помощью клеточных культур можно получать ценные биологически активные вещества (культура клеток женьшеня). Получение и изучение гибридных клеток позволяет решить многие вопросы теоретической биологии (механизмы клеточной дифференцировки, клеточного размножения и др.). Клетки, полученные в результате слияния протопластов соматических клеток, относящихся к разным видам (картофеля и томата, яблони и вишни и др.), являются основой для создания новых форм растений. В биотехнологии для получения моноклональных антител используются гибридомы — гибрид лимфоцитов с раковыми клетками. Гибридомы нарабатывают антитела, как лимфоциты, и обладают возможностью неограниченного размножения в культуре, как раковые клетки.
Метод пересадки ядер соматических клеток в яйцеклетки позволяет получить генетическую копию животного, то есть делает возможным клонирование животных. В настоящее время получены клонированные лягушки, получены первые результаты клонирования млекопитающих.
Метод слияния эмбрионов на ранних стадиях делает возможным создание химерных животных. Таким способом были получены химерные мыши (слияние эмбрионов белых и черных мышей), химерное животное овца-коза.
Смотреть оглавление (лекции №1-25)
Биология в лицее
Site biology teachers lyceum № 2 Voronezh city, Russian Federation
Основные направления селекции микроорганизмов
Микроорганизмам свойственна наследственная изменчивость – мутации. С помощью отбора мутаций создаются активные штаммы микроорганизмов, ценных для человека. Особенно широко и успешно в создании новых штаммов используется искусственный (индуцированный) мутагенез.
Методы селекции микроорганизмов. В основном это те же методы, которые используются и в селекции других организмов. Но микроскопические размеры и огромная скорость размножения микроорганизмов обусловливают разработку особых методов, ускоряющих процесс получения новых высокопродуктивных штаммов.

Интерфероны (англ. interference — помеха, от лат. интер — между и ферио — ударять, поражать) — общее название, под которым в настоящее время объединяют ряд белков со сходными свойствами, выделяемых клетками организма в ответ на вторжение вируса.

Механизм действия интерферонов следующий. При заражении клетки вирус начинает размножаться. Клетка-хозяин начинает в ответ на вирусную атаку выделение интерферона, который выходит из клетки и вступает в контакт с соседними клетками, делая их невосприимчивыми к вирусу. Он действует таким образом, чтобы подавить синтез вирусных белков или процессы сборки и выхода вирусных частиц (путём активации олигоаденилатциклазы). Таким образом, интерферон не обладает прямым противовирусным действием, но вызывает такие изменения в клетке, которые препятствуют в том числе и размножению вируса. Образование интерферона могут стимулировать не только интактные вирусы, но и различные другие агенты, например некоторые инактивированные вирусы, двухцепочечные РНК, синтетические двухцепочечные олигонуклеотиды и бактериальные эндотоксины.
Генная инженерия — совокупность приёмов, методов и технологий выделения генов из организма, осуществления манипуляций с генами и введения их в другие организмы. Генетическая инженерия — важнейший инструмент биотехнологии.
Генетическая инженерия служит для получения желаемых качеств изменяемого или генетически модифицированного организма (ГМО). В отличие от традиционной селекции, в ходе которой генотип подвергается изменениям лишь косвенно, генная инженерия позволяет непосредственно вмешиваться в генетический аппарат.
Как известно, в ДНК, в генах содержится информация-инструкция для синтеза в организме молекул РНК и белков, в том числе ферментов. Чтобы заставить клетку синтезировать новые, необычные для неё вещества, надо чтобы в ней синтезировались соответствующие наборы ферментов. А для этого необходимо или целенаправленно изменить находящиеся в ней гены, или ввести в неё новые, ранее отсутствовавшие гены. Изменения генов в живых клетках — это мутации. Но такие изменения нельзя контролировать или направлять. Поэтому учёные сосредоточили усилия на попытках разработать методы введения в клетку новых, совершенно определённых генов, нужных человеку.
Клеточная инженерия – это метод конструирования клеток нового типа путем гибридизации их содержимого. При гибридизации искусственно объединяют целые клетки разных организмов, создавая новый гибридный геном (совокупность генов в гаплоидном наборе хромосом вида). Также путем манипуляций (реконструкции) создают новую жизнеспособную клетку из отдельных фрагментов разных клеток (ядра, цитоплазмы, хромосом и др.) пересадкой ядер, слиянием протопластов (т. е. всего содержимого клетки без ядра и клеточной стенки) клеток разных видов.
Клеточная инженерия позволяет соединять в одной клетке наследственные материалы очень далеких видов, даже принадлежащих к разным царствам.
Использование живых клеток и биологических процессов для получения веществ, необходимых человеку, называют биотехнологией (от греч. bios – «жизнь», techne – «мастерство» и logos – «учение»).

Биотехнология основана на генетике, молекулярной биологии, биохимии, эмбриологии и клеточной биологии (цитологии), а также прикладных дисциплинах — химической и информационной технологиях и робототехнике.
В начале XX века начала активно развиваться бродильная и микробиологическая промышленность. Позже были предприняты первые попытки наладить производство антибиотиков, пищевых концентратов, полученных из дрожжей и др.
Сегодня множество пищевых продуктов и лекарственных препаратов изготавливаются с использованием биотехнологического производства.
Генная и клеточная инженерия – это два направления биотехнологии. Они имеют важное практическое значение в микробиологической промышленности для синтеза биологически активных веществ, нужных человеку.
Селекция микроорганизмов имеет важное значение для решения многих проблем микробиологической промышленности, а также для медицины, производства лекарств, сельскохозяйственной индустрии, для разработки методов и средств очистки окружающей среды от загрязнений.
Основные методы селекции микроорганизмов
Ищем педагогов в команду «Инфоурок»
Описание презентации по отдельным слайдам:
Описание слайда:
Тема:
«Основные методы селекции микроорганизмов»
Пименов А.В.
Глава IХ.
Генетика и селекция
Задачи:
Дать характеристику основным методам селекции микроорганизмов
Описание слайда:
Традиционная селекция микроорганизмов (в основном бактерий и грибов) основана на экспериментальном мутагенезе и отборе наиболее продуктивных штаммов. Но и здесь есть свои особенности. Геном бактерий гаплоидный, любые мутации проявляются уже в первом поколении.
Хотя вероятность естественного возникновения мутации у микроорганизмов такая же, как и всех других организмов (1 мутация на 1 млн. особей по каждому гену), но очень высокая интенсивность размножения дает возможность найти полезную мутацию по интересующему исследователя гену.
Традиционная селекция микроорганизмов
Описание слайда:
В результате искусственного мутагенеза и отбора была повышена продуктивность штаммов гриба пеницилла более чем в 1000 раз.
Продукты микробиологической промышленности используются в хлебопечении, пивоварении, виноделии, приготовлении многих молочных продуктов.
С помощью микробиологической промышленности получают антибиотики, аминокислоты, белки, гормоны, различные ферменты, витамины и многое другое.
Микроорганизмы используют для биологической очистки сточных вод, улучшений качеств почвы.
Традиционная селекция микроорганизмов
Описание слайда:
Новейшими методами селекции микроорганизмов, растений и животных являются клеточная, хромосомная и генная инженерия.
Генная инженерия основана на выделении нужного гена из генома одного организма и введении его в геном другого организма.
Описание слайда:
Описание слайда:
«Вырезании» генов проводят с помощью специальных «генетических ножниц», ферментов — рестриктаз, затем ген «вшивают» в вектор — плазмиду, с помощью которого ген вводится в бактерию.
«Вшивание» осуществляется с помощью другой группы ферментов — лигаз. Причем вектор должен содержать все необходимое для управления работой этого гена — промотор, терминатор, ген-оператор и ген-регулятор. Кроме того, вектор должен содержать маркерные гены, которые придают клетке-реципиенту новые свойства, позволяющие отличить эту клетку от исходных клеток.
Генная инженерия
Описание слайда:
Затем вектор вводится в бактерию, и на последнем этапе отбираются те бактерии, в которых введенные гены успешно работают.
Излюбленный объект генных инженеров — кишечная палочка, бактерия, живущая в кишечнике человека. Именно с ее помощью получают гормон роста — соматотропин, гормон инсулин, который раньше получали из поджелудочных желез коров и свиней, белок интерферон, помогающий справиться с вирусной инфекцией.
Генная инженерия
Описание слайда:
Бактерия Bacillus thuringiensis вырабатывает эндотоксин, разрушающий желудок насекомых и совершенно безвреден для млекопитающих. Из бактерии выделили этот ген и ввели его в в плазмиду почвенной бактерии Agrobacterium tumefaciens. Этой бактерией были заражены кусочки растительной ткани, выращиваемой на питательной среде.
Генная инженерия
Описание слайда:
Через некоторое время плазмиды, несущие ген белка-токсина, внедрились в растительные клетки и ген встроился в ДНК растений. Затем из этих кусочков вырастили полноценные растения. Гусеницы насекомых вредителей погибали на этом растении. Описанным путем к настоящему времени получили формы картофеля, томатов, табака, рапса, устойчивые к разнообразным вредителям.
Генная инженерия
Описание слайда:
Что изображено на рисунке?
Описание слайда:
Селекция микроорганизмов
Молекулярные биологи передали винограду ген морозоустойчивости от дикорастущего родственника капусты брокколи. Получение морозостойкого сорта заняло всего год (вместо 30 лет). Трансгенные растения выращивают во многих странах мира. На первом месте по размеру площадей под трансгенными растениями находятся США, Аргентина и Китай. Больше всего земли занимают трансгенные соя, кукуруза, хлопок, рапс и картофель.
Описание слайда:
Описание слайда:
Описание слайда:
Перенос новых генов в геном животных возможен с помощью микроинъекции ДНК в ядро яйцеклетки. Так получили трансгенную гигантскую мышь, которой ввели ген гормона роста крысы.
Генная инженерия
Описание слайда:
Описание слайда:
Описание слайда:
Хромосомная инженерия
Методы хромосомной инженерии.
Эффективно используются в селекции растений.
Мы уже знакомы с получением полиплоидных растений в результате кратного увеличения хромосом.
Метод замещенных линий основан на замещении одной пары гомологичных хромосом на другую.
Метод дополненных линий основан на введении в генотип растительного организма пары чужих гомологичных хромосом, контролирующих развитие нужных признаков. С помощью этих методов в растениях собираются признаки, приближающие к созданию «идеального сорта».
Перспективен метод гаплоидов, основанный на выращивании гаплоидных растений с последующим удвоением хромосом. Например, выращивают из пыльцевых зерен кукурузы гаплоидные растения, содержащие 10 хромосом, затем хромосомы удваивают и получают диплоидные (10 пар хромосом), полностью гомозиготные растения всего за 2 — 3 года вместо 6 — 8 летнего инбридинга.
Описание слайда:
Методы хромосомной инженерии
Метод дополненных линий
Метод замещенных линий
Метод гаплоидов
Получение полиплоидов
Описание слайда:
Методы клеточной инженерии связаны с культивированием отдельных клеток в питательных средах, где они образуют клеточные культуры. Оказалось, что клетки растений и животных, помещенных в питательную среду, содержащую все необходимые для жизнедеятельности вещества, способны делиться. Клетки растений обладают еще и свойством тотипотентности, то есть при определенных условиях они способны сформировать полноценное растение.
Клеточная инженерия
Описание слайда:
Описание слайда:
Продолжается работа по гибридизации клеток, получение гибридом. Например, разработана методика гибридизации протопластов соматических клеток. Удаляются клеточные оболочки и сливаются протопласты клеток организмов, относящихся к разным видам — картофеля и томата, яблони и вишни.
Перспективно создание гибридом, при котором осуществляется гибридизация лимфоцитов, образующие антитела, с раковыми клетками. В результате гибридомы нарабатывают антитела, как лимфоциты, и «бессмертны», как раковые клетки.
Клеточная инженерия
Описание слайда:
Интересен метод пересадки ядер соматических клеток в яйцеклетки. Таким способом возможно клонирование животных, получение генетических копий от одного организма. В настоящее время получены клонированные лягушки, получены первые результаты клонирования млекопитающих.
Клеточная инженерия
Описание слайда:
Возможно слияние эмбрионов на ранних стадиях, создание химерных животных. Таким способом были получены химерные мыши при слиянии эмбрионов белых и черных мышей, химерное животное овца-коза.
Клеточная инженерия
Описание слайда:
Методы клеточной инженерии
Использование клеточных культур
Получение гибридом
Клонирование
Слияние эмбрионов, получение химер
Описание слайда:
Повторение. Основные термины темы:
На чем основан метод замещенных линий:
На замещении одной пары гомологичных хромосом на другую.
На чем основан метод дополненных линий:
На введение в генотип пары гомологичных хромосом с нужными признаками.
На чем основан метод гаплоидов:
На выращивании гаплоидных растений с последующим удвоением хромосом.
На чем основан метод получения полиплоидов:
На увеличении хромосомного набора, кратное гаплоидному. Используется колхицин.
Что такое тотипотентность?
Клетки растений при определенных условиях способны сформировать полноценное растение.
Как можно использовать клеточные культуры?
Из отдельных клеток можно вырастить полноценные растения.
Описание слайда:
Повторение. Основные термины темы:
Как используется метод создания гибридом?
Осуществляется гибридизация клеток разных видов, например, лимфоцитов, образующие антитела, с раковыми клетками. В результате гибридомы нарабатывают антитела, как лимфоциты, и «бессмертны», как раковые клетки.
Как осуществляется клонирование животных?
Ядро соматической клетки пересаживается в яйцеклетку, из которой предварительно удалили ядро. Яйцеклетка активируется и после начала дробления пересаживается в матку суррогатной матери.
Как можно получить химерных животных?
Возможно слияние эмбрионов на ранних стадиях. Таким способом были получены химерные мыши при слиянии эмбрионов белых и черных мышей, химерное животное овца-коза.



